小檗碱在体外对食管癌细胞具有抗肿瘤活性。
摘要来源：World J Gastroenterol。 2017 年 4 月 14 日；23(14):2511-2518。 PMID：28465635
摘要作者：姜树贤、齐波、姚文建、顾成伟、魏秀峰、赵毅、刘玉珍、赵宝生
文章所属单位：蒋淑贤
摘要：目的：研究小檗碱对食管癌（EC）细胞和食管癌的影响
方法：采用人食管鳞癌细胞系KYSE-70和食管腺癌细胞系SKGT4 。小檗碱对细胞增殖的影响使用 3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基溴化四唑 (MTT) 测定法评估化合。对于细胞周期进展，KYSE-70 细胞用碘化丙啶 (PI) 染色缓冲液（10 mg/mL PI 和 100 mg/mL RNase A）染色 30 分钟，并使用 BD FACSCalibur 流式细胞仪分析细胞周期。对于细胞凋亡测定，细胞用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒染色。使用双激光流式细胞仪分析凋亡细胞的比率并使用BD ModFit软件进行估计。通过蛋白质印迹法检测与细胞周期和凋亡相关的蛋白质水平。
结果：小檗碱处理导致生长抑制KYSE-70和SKGT4细胞呈剂量依赖性和时间依赖性。 KYSE-70 细胞比 SKGT4 细胞更容易受到小檗碱的抑制活性的影响。 50μmol/L小檗碱处理KYSE-70细胞48 h后，G2/M期细胞数(25.94%±5.01%）显着高于对照组（9.77%±1.28%，P<0.01），小檗碱处理导致KYSE-70细胞中p21上调。流式细胞术分析表明，与对照细胞相比，小檗碱在治疗后 12 小时和 24 小时显着增加了 KYSE-70 凋亡群体（12 小时时为 0.83% vs 43.78%，P<0.05；24 小时时为 0.15% vs 81.86%） ，P<0.01)，小檗碱诱导细胞凋亡作用在24 h较12 h更强。 Western blotting 结果显示，小檗碱可抑制哺乳动物雷帕霉素靶点 Akt 和 p70S6K 的磷酸化，并持续增强 AMP 激活蛋白激酶的磷酸化。
结论：小檗碱是人EC细胞生长的抑制剂，可作为治疗EC患者的潜在药物。