小檗碱通过抑制神经母细胞瘤细胞中的癌症干细胞和上皮间质转化来诱导神经元分化。
摘要来源：植物医学。 2016 年 6 月 15 日；23(7):736-44。 Epub 2016 年 4 月 13 日。PMID：27235712
摘要作者：C R Naveen、Sagar Gaikwad、Reena Agrawal-Rajput
文章隶属关系：C R Naveen
摘要：背景：小檗碱是一种植物生物碱，多年来一直用于治疗胃肠道疾病。它还显示出在治疗代谢紊乱、神经退行性疾病和癌症方面具有广阔的药用价值；
假设：EMT 对于癌症干性和转移非常重要，导致无法区分；从而针对 EMT和相关途径可以具有临床益处。
研究设计：研究了小檗碱在 (i) 神经元分化和癌症方面的潜力干性抑制，(ii) 调节癌症干性的潜在分子机制，以及 (iii) EMT 逆转。
方法：使用 Neuro2a (N2a)神经母细胞瘤细胞(NB)；我们通过免疫荧光、RT-PCR、蛋白质印迹研究了小檗碱对神经元分化、癌症干细胞、EMT 和潜在信号传导的影响。高糖诱导的TGF-β介导的EMT模型用于通过Western blot和RT-PCR测试EMT逆转潜力。进行 STRING 分析以确定和验证功能性蛋白质相互作用网络。
结果：我们证明小檗碱可诱导神经元分化，同时增加神经元分化标志物，如 MAP2、β-III 微管蛋白 aNCAM；生成的神经元是可行的。小檗碱减弱癌症干细胞标记物 CD133、β-连环蛋白、n-myc、sox2、notch2 和巢蛋白。小檗碱通过抑制增殖、细胞周期蛋白依赖性激酶和细胞周期蛋白来增强 G0/G1 细胞周期停滞，通过增加 bax/bcl-2 比率导致细胞凋亡。肿瘤抑制蛋白 p27 和 p53 的恢复表明其具有良好的抗癌特性。 NCAM 的诱导及其多唾液酸化的减少表明具有抗迁移潜力，这得到了 MMP-2/9 下调的支持。它增加了上皮标记层粘连蛋白和 smad 以及增加的 Hsp70 水平也表明了其保护作用。分子研究表明，小檗碱通过下调 PI3/Akt 和 Ras-Raf-ERK 信号传导以及随后上调 p38-MAPK 来调节 EMT。 N2a 细胞的 TGF-β 分泌受到高葡萄糖的增强，并受到小檗碱通过调节 TGF-β 受体 II 和 III 的负向调节。小檗碱恢复间充质标记物，v网膜蛋白和纤连蛋白，以及上皮标记物 E-钙粘蛋白的恢复，突出了小檗碱在逆转 EMT 中的作用。
结论：总的来说，该研究通过抑制癌症干细胞的基本特征（致瘤性和分化失败）阐明了小檗碱对抗神经母细胞瘤的前瞻性用途，并引发 EMT 逆转。