富氢培养基通过 CACO-2 细胞中的 RHOA-MDIA1 信号传导改善脂多糖引起的屏障功能障碍。
摘要来源：震惊。 2016 年 2 月；45(2):228-37。 PMID：26529665
摘要作者：杨涛、王璐、孙瑞强、陈红光、张洪涛、于阳、王艳艳、王国林、于永浩、谢克亮
文章所属单位：杨涛
摘要：胃肠道屏障功能障碍与脓毒症的严重程度和预后相关。氢气 (H2) 可以改善脓毒症动物的多器官损伤。 Ras同源基因家族成员A (RhoA)和哺乳动物透明相关formin 1 (mDia1)对于调节紧密连接很重要n (TJ) 和粘附连接 (AJ)，两者都决定肠道屏障的完整性。本研究旨在探讨 H2 是否可以调节脂多糖 (LPS) 刺激的肠道屏障功能障碍以及 RhoA-mDia1 信号传导是否参与其中。 Caco-2细胞暴露于不同浓度的LPS（1μg/mL-1mg/mL）。通过跨上皮阻力（TER）和荧光素-异硫氰酸酯-葡聚糖通量评估肠屏障的通透性。通过Western blot和免疫荧光分析occludin和E-cadherin的表达和分布。通过 G-Lisa 测定测量 RhoA 活性，并通过蛋白质印迹评估 mDia1 表达。 LPS (100μg/mL) 降低了 TER 并增加了荧光素-异硫氰酸酯-葡聚糖通量，而富含 H2 的培养基可缓解这一问题。此外，H2 还能下调 LPS 诱导的氧化应激。此外，H2还改善了LPS引起的occludin和E-cadherin的表达下调和重新分布。添加理论上，H2 减轻了 LPS 引起的 RhoA 激活，并且 H2 对屏障的有益作用被 RhoA 激动剂 CN03 抵消。 Rho 抑制剂 C3 外切酶可减轻 LPS 诱导的屏障破坏。此外，富含H2的培养基增加了mDia1的表达，而mDia1的敲除消除了H2对屏障通透性的保护。 mDia1 敲除消除了 H2 诱导的 occludin 和 E-cadherin 益处。这些发现表明，H2 通过调节 RhoA-mDia1 信号传导改善 LPS 诱导的肠道屏障通透性过高以及 TJ 和 AJ 的破坏。