异甘草素通过靶向 miR-301b/LRIG1 信号传导抑制人类黑色素瘤生长。
摘要来源：J Exp Clin Cancer Res。 2018 年 8 月 6 日；37(1):184。 Epub 2018 年 8 月 6 日。PMID：30081934
摘要作者：向世健、陈火吉、罗晓军、安百超、吴文峰、曹思伟、阮十发、王朱贤、翁立东、朱红霞、刘强
文章单位：向石健
摘要：背景：异甘草素 (ISL)，一种从甘草根中分离出来的天然黄酮类化合物（甘草）具有多种药理特性，包括抗氧化、抗炎和抗癌活性。 MicroRNA（miRNA），一类小的非据报道，编码 RNA 的转录后调节因子在黑色素瘤中表达水平发生改变。本研究旨在探讨 ISL 的抗黑色素瘤作用及其潜在机制。
方法：我们研究了 ISL 的抗黑色素瘤作用及其潜在机制。 ISL对黑色素瘤细胞系增殖和凋亡的影响可通过功能测定进行，例如CCK-8测定、集落形成测定和流式细胞术。通过蛋白质印迹法测定凋亡相关基因的蛋白水平。高通量基因组测序用于筛选 ISL 处理后黑色素瘤细胞系差异表达的 miRNA。我们进行了功能测定，以确定 miR-301b（表达差异最大的 miRNA）及其靶基因富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域 1 (LRIG1) 的致癌作用，并通过生物信息分析、荧光素酶报告基因测定、蛋白质印迹和免疫组织化学测定证实在黑色素瘤中。免疫使用无损小鼠模型来确定 miR-301b 及其靶基因在体内黑色素瘤发生中的作用。 miR-301b 和 LRIG1 之间的关系在 GEO 数据集和组织标本中得到进一步验证。
结果：功能分析表明ISL对黑色素瘤细胞具有显着的生长抑制和凋亡诱导作用。 MiR-301b 是 ISL 处理后表达差异最大的 miRNA，并且显着下调。 ISL 对细胞生长的抑制作用可通过 miR-301b 的异位表达而逆转。瘤内给予 miR-301b angomir 可增强 ISL 对体内肿瘤生长的抑制作用。生物信息学分析表明，miR-301b可能靶向LRIG1，miR-301b抑制含有LRIG1 3UTR的报告构建体的荧光素酶活性以及LRIG1的表达水平。当 LRIG1 被沉默时，ISL 的抗癌作用会减弱。体内和体外。对患者黑色素瘤样本的分析显示，LRIG1 与 miR-301b 呈负相关。
结论：ISL 可能抑制通过抑制 miR-301b 并诱导其靶标 LRIG1 来促进黑色素瘤细胞的增殖。