青藤碱通过抑制自噬/NETosis/炎症轴改善佐剂诱导的关节炎。
摘要来源：Sci Rep. 2023 Mar 9 ; 13（1）：3933。 Epub 2023 年 3 月 9 日。PMID：36894604
摘要作者：江华、鲁庆、徐建、霍桂、蔡勇、耿树、徐华、张静、李华、袁坤、黄桂
文章作者单位：江华
摘要：研究发现，中性粒细胞胞外陷阱（NETs）是中性粒细胞激活后特定的死亡形式，在类风湿性关节炎的发病和进展中发挥着重要作用。本研究旨在探讨青藤碱对佐剂性关节炎小鼠的治疗作用，以及青藤碱对中性粒细胞活性的调节作用。风湿病d 局部注射佐剂建立关节炎模型，口服青藤碱治疗30天，期间评估关节炎评分并测量关节直径以确定疾病进展。处死后获取关节组织和血清用于进一步测试。进行细胞计数珠测定以测量细胞因子的浓度。对于石蜡包埋的踝关节组织，采用苏木精-伊红染色和番红O-fast染色监测关节组织变化。为了分析体内炎症、NETs和中性粒细胞自噬的情况，采用免疫组化方法检测局部关节的蛋白表达水平。为了描述青藤碱对体外炎症、自噬和NETs的影响，进行了蛋白质印迹和免疫荧光测定。青藤碱治疗后佐剂诱发的关节炎的关节症状得到缓解就踝关节直径和分数而言，效果显着。局部组织病理学变化的改善和血清中炎症细胞因子的减少也证实了疗效。青藤碱显着降低小鼠踝部白细胞介素6、P65和p-P65的表达水平。与模型组比较，青藤碱治疗组淋巴细胞抗原6复合物和髓过氧化物酶表达水平降低，说明青藤碱对中性粒细胞迁移有抑制作用。蛋白精氨酸脱亚胺酶4型(PAD4)、瓜氨酸组蛋白H3(CitH3)和微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的表达具有相似的趋势。体外激活脂多糖 (LPS) 后，青藤碱可抑制中性粒细胞 P65、细胞外信号调节激酶 (ERK) 和 P38 的磷酸化。同时，青藤碱抑制佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯（PMA）诱导的NETs形成，这通过d中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE)、PAD4 和 CitH3 的表达增加。青藤碱还根据 Beclin-1 和 LC3B 的变化抑制体外 PMA 诱导的自噬。青藤碱通过调节中性粒细胞活性来治疗佐剂性关节炎，具有良好的疗效。其机制除了抑制核因子κB（NF-κB）和丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）通路的激活外，还包括通过自噬抑制来抑制NETs的形成。