NF-κB抑制剂小白菊内酯促进2型糖尿病肾病肾小管白蛋白摄取。
摘要来源：《中华医学杂志》2020年3月31日；35(1)：31-42。 PMID：32299536
摘要作者：邱发豪、王宝宝、张伟、邱伟、刘千灵、李雪梅
文章所属单位：邱发豪
摘要：目的 肾小管重吸收受损是糖尿病肾病早期白蛋白尿增多的原因之一；然而，其根本机制尚未完全阐明。在本研究中，我们旨在探讨减少炎症和重塑胰岛素信号通路是否可以改善肾小管的白蛋白摄取。方法 8周龄雄性db/db小鼠（=8），2型糖尿病肾病模型，每隔一天腹腔注射核因子κ-B（NF-κB）抑制剂小白菊内酯（PTN，1mg/kg），持续8周，治疗组。同时，对年龄匹配的雄性db/m小鼠（=5只）和db/db小鼠（=8只）给予生理盐水治疗作为对照组和2型糖尿病肾病组。处死小鼠后，采集血液和尿液检查胰岛素抵抗稳态模型评估（HOMA-IR）和尿白蛋白肌酐比值，并使用肾脏样本通过高碘酸希夫（PAS）染色、NF分析分析组织病理学变化。 -κB p65、AKT (p-AKT) 的磷酸化、免疫组织化学和蛋白质印迹的无羊膜和 cubilin 表达，以及使用免疫荧光的肾小管白蛋白摄取。此外，将HKC细胞分为仅用胰岛素处理的胰岛素组、用胰岛素和肿瘤坏死因子（T）处理的TNF-α组。NF-α），TNF-α+PTN 组暴露于 PTN、胰岛素和 TNF-α。检测HKC细胞白蛋白摄取水平以及NF-κB p65、p-IRS-1/IRS-1、p-AKT/AKT、amnionless和cubilin表达水平。结果与db/db组相比,db/db+PTN组HOMA-IR(36.83±14.09.31.07±28.05)、尿白蛋白肌酐比值(190.3±7.3.143.0±97.6 mg/mmol)降低;然而，差异无统计学意义（>0.05）。高碘酸-希夫染色显示PTN可以减轻db/db小鼠肾小球肥大并减少系膜区基质。与db/m组相比，db/db组肾脏NF-κB p65表达增加，p-AKT（s473）表达减少（<0.05）。与db/db组相比，PTN显着降低肾NF-κB p65表达并改善p-AKT (s473)的下降(<0.05)。与db/m组相比,amnionless和cubilin表达减少,肾小管白蛋白摄取减少db/db组e减少(<0.05)，PTN可显着增加cubilin的表达(<0.05)，并改善肾小管白蛋白摄取。胰岛素促进 HKC 细胞中白蛋白的摄取以及 amnionless 和 cubilin 的表达 (<0.05)。 TNF-α 刺激 HKC 细胞中 NF-κB p65 的表达，增加 p-IRS-1 (s307) 并减少 p-AKT (s473) (<0.05)。与TNF-α组相比，TNF-α+PTN组NF-κB p65表达下降，p-IRS-1（s307）和p-AKT（s473）表达恢复（<0.05）。 TNF-α组amnionless和cubilin表达降低（<0.05），PTN可显着增加cubilin表达（<0.05）。结论炎症导致胰岛素信号传导受损，从而减少无羊膜-cubilin 表达和白蛋白摄取。 PTN可以减轻炎症并重塑受损的胰岛素信号通路，从而促进cubilin的表达和白蛋白的摄取。我们的研究可以揭示炎症在减少炎症中的作用肾小管白蛋白摄取在2型糖尿病肾病中的作用。