晚期糖基化终末产物通过诱导氧化应激和内质网应激抑制大鼠 Leydig 细胞分泌睾酮。
摘要来源：Int J Mol Med。 2016 年 6 月 16 日。Epub 2016 年 6 月 16 日。PMID：27315604
摘要作者：赵云涛、齐亚伟、胡传银、陈少红、刘友
文章所属单位：云-赵涛
摘要：糖尿病严重损害男性生殖能力。本研究评估了晚期糖基化终末产物 (AGE) 对大鼠 Leydig 细胞睾酮分泌的影响和作用机制，该产物在糖尿病并发症的发生中发挥着重要作用。培养原代大鼠 Leydig 细胞并用 AGE（25、50、100 和 200 µg/ml）处理。通过 ELISA 测定人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 诱导的睾酮产生。类固醇激素 mRNA 和蛋白表达水平分别通过逆转录定量 PCR 和蛋白质印迹分析来测量参与睾酮生物合成的烯酸急性调节蛋白 (StAR)、胆固醇侧链裂解酶 (P450scc) 和 3β-羟基类固醇脱氢酶 (3β-HSD)。使用二氯荧光素二乙酸酯 (DCFH-DA) 探针测量 Leydig 细胞中活性氧 (ROS) 的产生。通过蛋白质印迹分析测量 Leydig 细胞中内质网应激相关蛋白 [C/EBP 同源蛋白 (CHOP) 和葡萄糖调节蛋白 78 (GRP78)] 的表达水平。我们发现，与对照组相比，AGEs 显着抑制了 hCG 诱导的大鼠 Leydig 细胞的睾酮生成，且呈浓度依赖性（P<0.01）。与对照组相比，AGEs以剂量依赖性方式下调StAR、3β-HSD和P450scc的mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）。抗氧化剂，N-乙酰基-L-半胱氨酸 (NAC) 和内质网应激抑制剂牛磺熊去氧胆酸 (TUDCA) 可以逆转 AGE 的抑制作用。此外，经AGEs处理的Leydig细胞中ROS的含量显着增加。 Leydig 细胞中 AGEs 显着上调了 CHOP 和 GRP78 的表达水平。由此可见，AGEs通过诱导氧化应激和内质网应激来抑制大鼠Leydig细胞产生睾酮。