灵芝酸 D 诱导除食管鳞癌细胞凋亡外的协同自噬性细胞死亡。
摘要来源：J Ethnopharmacol。 2020 年 11 月 15 日；262:113213。 Epub 2020 年 8 月 2 日。PMID：32755651
摘要作者：邵长生、周秀宏、郑新新、黄庆
文章所属单位：邵长生
摘要：民族药理学相关性：灵芝在中国被用作药用蘑菇已有 2000 多年的历史。灵芝酸D（GAD）作为灵芝中代表性的活性三萜类化合物，已知具有抗癌活性。然而，其抗癌细胞过程所涉及的机制仍然很大程度上难以捉摸。
研究目的：我们的研究旨在研究GAD对食管鳞癌的抗癌作用细胞癌 (ESCC) 细胞及其细胞水平的潜在机制。
材料和方法：EC9706 和 Eca109 细胞用GAD（0、10、20、40μM）处理24小时。检测细胞活力、细胞周期、活性氧（ROS）、线粒体膜电位（MMP）、凋亡率、caspase-3活性、自噬流、溶酶体功能。采用Western blot方法分析细胞周期、凋亡、自噬和mTOR信号通路相关蛋白，如P53、Cyclin B1、CytoC、PARP、Beclin-1、P62、LC3、PI3K、AKT和mTOR。
结果：GAD 抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡和自噬性细胞死亡。特别是，我们发现在自噬过程的早期阶段，GAD可以启动并增强自噬信号，而在后期，GAD反而可以通过削弱自噬信号来阻断自噬通量。激动体-溶酶体融合并抑制溶酶体降解。除了自噬性细胞死亡外，GAD 还同时诱导 caspase 相关过程介导的细胞凋亡。还探讨了协同凋亡和自噬性细胞死亡的机制。我们发现GAD下调mTOR信号通路中PI3K、AKT和mTOR磷酸化蛋白的表达，从而对ESCC细胞的凋亡和自噬性细胞死亡产生协同作用。
结论：综上所述，本研究证明 GAD 可能通过食管鳞癌细胞中的 mTOR 通路抑制细胞增殖，并通过破坏自噬通量。因此，这项工作也表明 GAD 可作为 ESCC 癌症治疗的有效抗癌佐剂。