头穴电针通过下调RORγt、促进IL-17ATh17/FOXP3Treg平衡减轻MCAO大鼠脑缺血性炎症损伤。
摘要来源：针刺研究。 2024 年 2 月 25 日；49(2):135-144。 PMID：38413034
摘要作者：袁博、方晓玲、杨尚伟、田甜、朱令贵、李英、杜晓正、彭晓云、姚晓强、金海王
文章来源：袁博
摘要：目的：观察电针（EA）的疗效头穴（顶涅前-斜线，MS6）对视黄醇相关孤儿受体γT（RORγt）、白细胞介素（IL）-17A、IL-10、转化生长因子-β1（TGF-β1）、IL-6表达的影响、IL-21 和 IL-17AT 辅助细胞 (Th) 17 和叉头转录因子 P3 (FOXP3) 调节性 T 细胞 (Treg) 分化
方法：120只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、抑制剂组、激动剂组和电针+激动剂组，每组15只。采用Longas法闭塞左侧大脑中动脉建立缺血性脑卒中模型。 EA组和EA+激动剂组大鼠双侧MS6电针(2Hz/100Hz,1mA)30min,每日1次,连续7天。抑制剂组大鼠腹腔注射SR1001（RORγt抑制剂）溶液（2.5 mg/mL，10 mg/kg），每日1次，连续7天。激动剂组和EA+激动剂组大鼠在电针前腹腔注射SR1078（RORγt激动剂）溶液（5 mg/mL、5 mg/kg），每日1次，连续7 d。假手术组和模型组大鼠抓取并固定与其他组的情况相同。在干预前后评估玉米-长加斯评分、改良神经严重程度评分（mNSS）和神经行为评分。实验结束时，收集缺血皮质组织。采用2,3,5-氯化三苯基四唑(TTC)染色检测脑梗死体积。实时定量PCR检测RORγt mRNA表达量；Western blot检测RORγt、IL-17A、IL-10、TGF-β1蛋白表达水平；检测IL-6、IL-21免疫活性免疫组化法；免疫荧光法测定缺血皮质组织中IL-17ATh17和FOXP3Treg细胞的荧光面积并计算其比例。
结果： 与假手术组相关，模型组Zea-Longas评分、mNSS评分、神经行为评分、脑梗死体积、exRORγt mRNA 和蛋白、IL-17A 蛋白、IL-6 和 IL-21 免疫活性、IL-17ATh17 免疫荧光强度、IL-17ATh17/FOXP3Treg 比值降低（<0.01），表达水平明显下降TGF-β1 和 IL-10 蛋白以及 FOXP3Treg 免疫荧光强度 (<0.01)。与模型组相比，EA组和抑制剂组的Zea-Longas评分、mNSS评分、神经行为评分、脑梗死体积、RORγt mRNA和蛋白、IL-17A蛋白、IL-6和IL-6表达水平均显着降低。 IL-21免疫活性、IL-17ATh17免疫荧光强度和IL-17ATh17/FOXP3Treg比值（<0.01，<0.05），TGF-β1和IL-10蛋白表达水平以及FOXP3Treg免疫荧光强度明显增加（ <0.05，<0.01），而激动剂组上述指标均出现逆转（<0.01，<0.05）。激动剂组与 EA+激动剂组的比较显示，Zea-Longas 评分、mNSS 评分、神经行为评分re、脑梗死体积、RORγt mRNA和蛋白表达水平、IL-17A蛋白、IL-6和IL-21免疫活性、IL-17ATh17免疫荧光强度、IL-17ATh17/FOXP3Treg比值显着降低（<0.01， <0.05)，且电针+激动剂组TGF-β1、IL-10蛋白表达量及FOXP3Treg免疫荧光强度均明显高于激动剂组(<0.01，<0.05)，提示电针干预可有效削弱
结论：头皮穴位MS6电针可有效改善神经功能、行为反应，减少脑损伤。缺血性脑卒中大鼠梗死体积的增加，可能与其下调RORγt表达，促进IL-17ATh17/FOXP3Treg平衡，减轻缺血性脑卒中后炎症损伤有关。