熊果酸通过在体外恢复小胶质细胞激活的 MMP/TIMP 失衡来改善神经元损伤。
摘要来源：Drug Des Devel Ther。 2023 年；17：2481-2493。 Epub 2023 年 8 月 22 日。PMID：37637267
摘要作者：邱露英、王亚轩、王玉业、刘芳、邓淑敏、薛伟霜、王艳哲
文章所属单位：邱露英
摘要：目的：氧糖剥夺-再氧合（OGDR）模型广泛用于评估缺血性中风和脑缺血再灌注（I/ R) 体外损伤。过度激活的小胶质细胞会产生促炎介质，例如基质金属蛋白酶 [MMP] 及其特异性抑制剂、组织金属蛋白酶 [TIMP] 抑制剂，导致神经元损伤。熊果酸 (UA) 在大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注 (MCAO/R) 模型中充当神经保护剂，保持 MMP/TIMP 平衡，但潜在机制尚不清楚。我们的研究使用 OGDR 模型来确定 UA 是否以及如何通过逆转 I/R 损伤中小胶质细胞引起的 MMP/TIMP 失衡来减轻神经元损伤。
方法：SH-SY5Y细胞先用95%N和5%CO培养，然后定期培养用于OGDR模型。测试了细胞活力以获得适当的 UA 剂量。我们建立了SH-SY5Y细胞和脂多糖（LPS）和干扰素γ（IFNγ）刺激的小胶质细胞条件培养基（MCM）的共培养系统。通过 ELISA 测定测量 MMP9 和 TIMP1 水平以确认 UA 效果。我们添加重组MMP9（rMMP9）和TIMP1中和抗体（抗TIMP1）进行再次确认。透射电子显微镜是用于观察细胞形态，流式细胞仪和Annexin V-FITC和PI标记用于凋亡情况。我们进一步测量了 SH-SY5Y 细胞中的钙荧光强度。
结果：MCM 显着降低了 SH-SY5Y 细胞的活力。 OGDR后的SY5Y细胞（0.01），经UA（0.25μM）后恢复（<0.05），而乳酸脱氢酶活性、神经元内钙浓度和凋亡相关指标经UA处理后显着改善（<0.01）。 UA 通过降低共培养系统中的 MMP9 表达和增加 TIMP1 表达来纠正 MMP/TIMP 失衡 (<0.01)，并且通过给予 rMMP9 和抗 TIMP1 减轻 UA 对 SH-SY5Y 细胞的影响 (<0.01) .
结论：我们证明，UA 通过稳定 OGDR 缺血再灌注损伤模型，抑制小胶质细胞诱导的神经元细胞死亡。 MMP9/TIMP1 失衡。