四甲基吡嗪通过下调 miR-214-3p 减轻受损脊髓的神经细胞凋亡。
摘要来源：Biomed Pharmacother。 2017 年 10 月；94:827-833。 Epub 2017 年 8 月 10 日。PMID：28802236
摘要作者：范远志、吴耀池
文章所属单位：范远志
摘要：目的：评价川芎嗪对脊髓损伤（SCI）大鼠模型中微小RNA-214-3p（miR-214-3p）的调节作用，阐明川芎嗪的神经保护作用及其机制。
方法：10只Sprague-Dawley大鼠建立SCI大鼠模型，检测SCI 后 7 天通过 qRT-PCR 和 Western blotting 检测 miR-214-3p 和 Bcl2l2。进行BBB评分测试o 评估 SCI 后 21 天的运动功能恢复情况。将25只SCI大鼠随机分为5组：SCI阴性对照（NC）组、四甲基吡嗪（TMP）组、miR-214-3p agomir组、TMP/agomir组和假手术组。对大鼠进行为期两周的含或不含 TMP 的注射治疗。注射后7天通过qRT-PCR和Western blotting测量miR-214-3p、Bcl2l2、Bax和caspase 3的表达水平。进行末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）测定来检测体内细胞凋亡。测量荧光素酶活性以验证 Bcl2l2 mRNA 3-UTR 中的 miR-214-3p 靶位点。还用TMP处理损伤原代培养的神经元细胞，并通过流式细胞术测定体外细胞凋亡。
结果： SCI 后，miR-214-3p 上调，而抗凋亡蛋白 Bcl2l2 下调。 TMP抑制通过降低 miR-214-3p 的水平并增加 Bcl2l2 的表达水平来促进体内细胞凋亡。通过荧光素酶报告基因测定鉴定并验证了 Bcl2l2 mRNA 3UTR 中 miR-214-3p 的潜在靶位点。此外，TMP在体外能有效抑制神经元细胞凋亡。
结论：TMP通过下调损伤脊髓神经细胞凋亡-miR-214-3p的调节。