黄芪甲苷 IV 通过激活自噬防止 IL-1β 诱导的软骨细胞损伤。
摘要来源：Curr Mol Med。 2023 年 10 月 19 日。Epub 2023 年 10 月 19 日。PMID：37855351
摘要作者：徐航、王静波、陈月平、黄伟、宗博
文章所属单位：徐航
摘要：背景：骨关节炎 (OA) 是一种影响关节软骨的慢性炎症性疾病。黄芪甲苷 (AS-IV) 是中草药黄芪 (Radix Astragali Mongolici) 的主要活性成分。 AS-IV 具有抗炎和抗凋亡特性，在各种炎症和凋亡相关疾病中具有治疗潜力。然而，其对 OA 的药效尚未完全确定。
目的：本研究旨在研究 AS-IV 对 IL-1β 处理的大鼠软骨细胞的保护作用，并确定自噬是否在这种作用中发挥作用。
方法：从新生SD小鼠膝关节中分离培养软骨细胞。研究设置空白对照组、模型组、AS-IV浓度梯度组（50、100、200μmol/L）对软骨细胞进行干预。采用 MTT 测定来评估不同培养时期的细胞活力，从而确定合适的浓度和持续时间。随后，用最佳AS-IV浓度处理软骨细胞，并分为三组：模型组复制IL-1β诱导的炎性软骨细胞损伤，AS-IV组接受AS-IV和IL-1β共培养，并设立空白对照组。使用幽灵笔观察细胞形态和结构的变化环肽染色。 ELISA用于测量细胞上清液中TNF-α和GAG的水平。 RT-qPCR 评估 p62 和 LC3 mRNA 表达，Western Blot 评估 p62 和 LC3Ⅱ/Ⅰ 蛋白表达。
结果：AS -IV促进软骨细胞增殖，同时抑制细胞凋亡。确定了最佳的 AS-IV 剂量为 200μmol/L，合适的反应时间为 48 小时。鬼笔环肽染色显示，与空白对照组相比，模型组细胞骨架呈现梭形变化，免疫荧光强度降低。 AS-IV组表现出更多的多边形细胞骨架形态，免疫荧光强度增加。 AS-IV 降低了培养物上清液中的 TNF-α 水平并升高了 GAG 水平。此外，AS-IV 降低了培养软骨细胞中 p62 mRNA 和蛋白的表达，同时增加了 LC3 mRNA 的表达。
结论：我们的研究结果表明 AS-IV 可以减轻炎症性软骨细胞损伤，通过潜在的自噬抑制机制保护软骨细胞。这些结果表明 AS-IV 可以为 OA 提供预防优势。