[流感病毒粒子作为蛋白水解酶的底物]。
摘要来源：Bioorg Khim。 2008年5月-6月；34(3):409-15。 PMID：18672693
摘要作者：Iu A Smirnova、LV Kordiukova、MV Serebriakova、I Iu Filippova、EN Lysogorskaia、L A Baratova
摘要：A/Puerto Rico/8 株流感病毒体的蛋白水解/34（H1N1 亚型）通过各种酶进行研究，以开发一种研究病毒体环境基本蛋白质成分的结构组织和相互作用的方法：血凝素 (HA)、跨膜同源三聚体糖蛋白和基质蛋白 M1 形成脂质膜下的一层。在测试的蛋白水解酶和酶制剂（嗜热菌蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶嘉士伯、链霉蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶）中，半胱氨酸蛋白酶菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶以及酶制剂pronase 有效地删除了 HA 胞外域，而胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶 Carlsberg 仅删除了其中的一部分。 MALDI TOF 质谱分析使我们能够定位各种酶制剂水解 HA 的位点。菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和链霉蛋白酶在位于跨膜结构域 (HA2 185-211) 之前的 K177 残基之后分裂多肽链。嘉士伯枯草杆菌蛋白酶在其他邻近点处水解肽键：L178（碱性位点）或 V176 之后。通过半胱氨酸蛋白酶 Glp-Phe-Ala-pNA 的高度特异性显色底物测量的菠萝蛋白酶的水解活性在 5 mM β-巯基乙醇存在下几乎比在 50 mM 存在下高三倍。然而，HA高活性酶和低活性酶完全去除HA、HA和低活性酶的外结构域需要相同的时间间隔。在没有还原剂的情况下，菠萝蛋白酶去除 HA 的速度稍微慢一些d 伴随着蛋白质 Ml1 的显着断裂。研究了半胱氨酸蛋白酶特异性抑制剂反式环氧琥珀酰-L-亮氨酰氨基)丁烷(E-64)和HgCl2对菠萝蛋白酶水解HA和M1蛋白的作用。