天麻素通过上调 microRNA-21 保护大鼠心肌细胞 H9c2 免受缺氧诱导的损伤。
摘要来源：Int J Biochem Cell Biol。 2019 年 4 月；109:8-16。 Epub 2019 年 1 月 23 日。PMID：30684569
摘要作者：于星、李凌
文章所属单位：于星
摘要：背景：天麻素（GSTD）在心肌梗死（MI）中的体内保护作用已有报道。然而，其根本机制仍不清楚。在此，我们旨在探讨 GSTD 对缺氧损伤的 H9c2 细胞以及下游 microRNA (miRNA) 和信号级联的影响。
方法： 构建缺氧损伤模型来模拟心肌梗死。采用CCK-8法、Western blot分析检测GSTD预处理对细胞增殖和凋亡的影响。分别进行裂解和流式细胞术/蛋白质印迹分析。通过茎环 RT-PCR 测定缺氧或缺氧加 GSTD 处理的细胞中 miR-21 的表达。随后验证了 GSTD 是否通过 miR-21 影响缺氧损伤的细胞。通过生物信息学方法和荧光素酶报告基因分析研究了miR-21的直接靶点。此外，通过Western blot分析验证了PTEN/PI3K/AKT和NF-κB通路中关键激酶的表达水平。
结果：GSTD 预处理可减轻缺氧引起的细胞活力下降、p53 和 p16 上调、凋亡细胞增加以及 Bax、cleaved casapse-3 和 cleaved caspase-9 上调。缺氧时 miR-21 的表达上调，并通过 GSTD 处理进一步上调。在转染的 H9c2 细胞中，GSTD 对缺氧处理细胞的影响因 miR-21 过表达而增强，而因 miR-21 抑制而逆转。 PDCD4被证实是miR-21的直接靶标，并逆转了miR-21对缺氧损伤细胞的作用。最后，GSTD 通过上调 miR-21 下调 PTEN 表达并增强 PI3K、AKT、p65 和 IκBα 的磷酸化水平。
结论：< /span>GSTD 通过上调 miR-21 激活 PTEN/PI3K/AKT 和 NF-κB 通路，减轻 H9c2 细胞缺氧损伤。