姜黄素对血管平滑肌细胞细胞周期进程和凋亡的影响。
摘要来源：Br J Pharmacol。 1998 年 7 月；124(6)：1029-40。 PMID：9720770
摘要作者：陈浩文、黄浩昌
文章所属单位：台北国立台湾大学医学院药理系。
摘要：1．在大鼠主动脉平滑肌细胞系 (A7r5) 中研究了姜黄素（二阿魏酰甲烷）（香料姜黄中的一种多酚）对血管平滑肌细胞的抗增殖和凋亡作用的可能机制。 2.根据[3H]-胸苷的摄取来确定增殖反应。姜黄素(10(-6)-10(-4) M)以浓度依赖性方式抑制A7r5细胞和兔培养的血管平滑肌细胞的血清刺激的[3H]-胸苷掺入。细胞活力，由 tr 测定ypan蓝染料排除法显示，A7r5细胞中姜黄素在10(-6)至10(-5)M浓度范围内不受姜黄素影响。然而，10(-4)M姜黄素处理后的活细胞数低于基础值(2×10(5)个细胞)。 3.为了分析细胞周期的各个阶段，每3小时测定[3H]-胸苷掺入DNA的情况。胎牛血清刺激后，静止的A7r5细胞在9至12小时（G1/S期）内开始DNA合成，然后在15至18小时（S期）达到最大值。在G1/S期或S期添加的姜黄素(10(-6)-10(-4) M)显着抑制[3H]-胸苷掺入。 4.姜黄素(10(-6)-10(-4)M)处理后，利用流式细胞术对碘化丙啶染色的细胞进行细胞周期分析，显示G0/G1期停滞和S期细胞百分比减少。 10(-4) M 的姜黄素也诱导细胞凋亡。表明姜黄素抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡，因此呈红色引起[3H]-胸苷掺入。 5. 苏木精-伊红染色、TdT 介导的 dUTP 缺口末端标记 (TUNEL) 和 DNA 梯带法也证明了 10(-4) M 姜黄素的凋亡作用。姜黄素 (10(-4) M) 诱导细胞收缩、染色质浓缩和 DNA 断裂。 6.姜黄素在10(-5)至10(-4)M浓度范围内显着降低A7r5细胞中血清刺激的膜蛋白酪氨酸激酶活性。另一方面，佛波醇刺激的胞质蛋白激酶C活性显着降低。 10(-4) M 姜黄素可还原酯，但不受较低浓度 (10(-6)-10(-5) M）的影响。 7.使用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分析c-myc、p53和bcl-2 mRNA的水平。姜黄素(10(-5)-10(-4)M)处理显着降低了c-myc mRNA水平。并且，10(-4)M姜黄素显着降低了bcl-2 mRNA的水平。然而，姜黄对 p53 mRNA 水平的改变n(10(-5)-10(-4)M)处理没有达到显着性。然后通过 Northern blotting 证实了姜黄素对 c-myc 和 bcl-2 mRNA 水平的影响。 8. 我们的结果表明，姜黄素抑制血管平滑肌细胞的细胞增殖、阻止细胞周期进程并诱导细胞凋亡。姜黄素可用作开发药物的模板，以预防动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄的病理变化。我们的结果表明，姜黄素的抗增殖作用可能部分是通过抑制蛋白酪氨酸激酶活性和 c-myc mRNA 表达来介导的。并且，细胞凋亡作用可能部分是通过抑制蛋白酪氨酸激酶活性、蛋白激酶C活性、c-myc mRNA表达和bcl-2 mRNA表达来介导的。