雾化吸入人参总皂苷通过SMAD2信号介导机制修复急性肺损伤并抑制肺纤维化。
摘要来源：植物医学。 2024 年 7 月 14 日；133:155871。 Epub 2024 年 7 月 14 日。PMID：39098168
摘要作者：徐家安、周力、陈慧欣、何宇洲、赵国平、李兰、Thomas Efferth、丁志山、单乐天
文章所属单位：家安徐
摘要：背景：肺纤维化（PF）是一种由既往急性肺损伤（ALI）引起的进行性肺部疾病，但目前尚无令人满意的治疗方法。药物雾化吸入是治疗PF的有效方法。人参总皂苷 (TG) 显示出治疗 ALI 和 PF 的潜力，但吸入 TG 的效果仍不清楚。
目的：确定TG在ALI和PF中的治疗效果，评估吸入形式TG相对于常规形式的优越性，并阐明吸入TG的作用机制。
方法：超高效液相色谱与 Q-Exactive Orbitrap 质谱联用 (UPLC-QE-MS) 测定化学分布TG。建立ALI和PF小鼠模型，通过支气管肺泡灌洗液（BALF）分析、组织病理学观察、羟脯氨酸测定和免疫组织化学分析来评估吸入TG的作用。采用原代小鼠肺成纤维细胞 (MLF) 和人肺成纤维细胞系 (HFL1)，通过细胞活力测定、实时定量 PCR (qPCR) 测定和蛋白质印迹 (WB) 分析来确定 TG 的体外作用和机制.
结果：UPLC-QE-MS 结果揭晓d TG中人参皂苷的主要类型包括Re(14.15±0.42%)、Rd(8.42±0.49%)、Rg1(6.22±0.42%)、Rb3(3.28±0.01%)、Rb2(3.09±0.00%)、 Rc（2.33±0.01%）、Rg2（2.09±0.04%）、Rb1（1.43±0.24%）和Rf（0.13±0.06%）。吸入剂量为 10、20 和 30 mg/kg 的 TG 可显着减轻小鼠的 ALI 和 PF。 BALF 和 HE 染色分析显示，TG 调节 IFN-γ、IL-1β 和 TGF-β1 的水平，减少炎症细胞浸润，并恢复肺组织的肺泡结构。此外，HE 和 Massons 三色染色表明，TG 显着减少成纤维细胞灶和胶原纤维沉积，这可以通过蓝染胶原纤维的减少来证明。羟脯氨酸测定和免疫组织化学分析表明，TG 显着降低羟脯氨酸水平并下调 Col1a1、Col3a1 和 α-sma 的表达。当使用可比较的剂量时，TG 的吸入给药比口服途径显示出更高的功效d.此外，CCK8 测定证明，与吡非尼酮相比，吸入 TG 显示出优越的安全性和治疗特性，该测定证实 TG 浓度范围在 20 至 120μg/ml 之间是无细胞毒性的。 qPCR和WB分析表明，TG在25、50和100μg/ml浓度下，显着抑制TGF-β1诱导的smad2磷酸化，并下调纤维化基因和蛋白的表达，包括α-sma、Col1a1、Col3a1和 FN1，表明由 smad2 信号通路介导的抗纤维化机制。在体外，TG 的安全性和有效性也优于吡非尼酮。
结论：这项研究表明，首次证实吸入TG治疗ALI和PF的疗效。吸入TG可有效抑制炎症并减少胶原蛋白沉积，特别强调其在调节Smad2信号通路中的作用，这对于TG 的抗纤维化机制。该研究还强调了吸入 TG 相对于口服途径的优越性，以及与吡非尼酮相比其良好的安全性，使其成为 ALI 和 PF 治疗的理想替代方案。