[咖啡酸苯乙酯对朊病毒复制、扩增和原纤维形成的抑制潜力研究]。
摘要来源：中华医药医学杂志。 2024 年 7 月 6 日；58(7):1011-1019。 PMID：39034785
摘要作者：Z Y Chao、X X Jia、J F Zeng、Y Z Wu、K Shaw、LP Gau、Q Shi、X P Dong、C Chen
文章所属单位：Z Y Chao
摘要：探讨咖啡酸苯乙酯（CAPE）对朊病毒（PrP）复制、扩增和纤维形成的影响及可能机制。采用CCK8法检测朊病毒感染细胞的活力。 CAPE处理3天和7天后的细胞模型SMB-S15，获得CAPE对SMB-S15的最大安全浓度。以安全范围内的浓度处理细胞，比较CAPE前后细胞中PrP的含量。通过蛋白质印迹分析饮食。使用蛋白质错误折叠循环扩增 (PMCA) 和蛋白质印迹来评估 CAPE 处理后扩增产物中 PrP 水平的变化。采用实时震动诱导转化测定（RT-QuIC）技术探讨CAPE治疗前后原纤维形成的变化。采用分子相互作用测定法测定CAPE与鼠重组全长朊病毒蛋白之间的结合亲和力。CCK8细胞活力测定结果表明，1μmol/L CAPE处理3天和7天与对照组相比，细胞活力没有表现出统计学上的显着差异。对照组（均<0.05）。然而，当CAPE浓度超过1μmol/L时，与对照组相比，CAPE处理3天和7天的细胞活力显着降低（均<0.05）。因此，确定1μmol/L为CAPE处理SMB-S15细胞的最大安全浓度。西方rn印迹结果显示，用CAPE处理3天和7天导致SMB-S15细胞中PrPin水平可检测到的降低（全部<0.05）。使用蛋白质印迹评估 PMCA 实验的产物。结果显示，经CAPE处理后，适应菌株SMB-S15、139A和ME7的PMCA扩增产物中PrP（相对灰度值）水平与对照组相比显着降低（均<0.05）。 RT-QuIC 实验结果表明，经 CAPE 处理的小鼠适应株 139A、ME7 和 SMB-S15 以及感染朊病毒的 SMB-S15 细胞中原纤维形成减少（如 ThT 峰值所示）。此外，CAPE对不同种子原纤维的形成表现出不同程度的抑制作用，观察到统计学上显着的差异（均<0.05）。值得注意的是，CAPE 对 ME7 种子原纤维表现出更明显的抑制作用。分子相互作用分析表明 C 之间存在显着结合APE与鼠重组朊病毒蛋白的结合常数为(2.92±0.41)×10mol/L。CAPE抑制PrPreplication、扩增和原纤维形成可能是由于与朊病毒蛋白在分子水平上的特异性相互作用。