用木瓜蛋白酶去除供体人类白细胞抗原 I 类蛋白:可能的整个器官实践的翻译。
摘要来源:移植。 2015 年 4 月;99(4):724-30。 PMID:25340603
摘要作者:Toshiyuki Mera、Denise L Faustman
文章隶属关系:Toshiyuki Mera
摘要:背景: span>木瓜蛋白酶是一种在移植中具有潜在用途的蛋白酶,因为它具有从供体人类细胞中选择性去除人类白细胞抗原 (HLA) I 类蛋白的靶向能力。然而,其蛋白水解活性尚未在适合供体器官灌注的条件下进行研究,即在 4°C 温度下并溶解在 Belzer-UW 溶液中。
方法:我们在识别下测试木瓜蛋白酶 HLA I 类去除活性降低温度的全器官移植条件。使用测试底物(酪蛋白)和新鲜外周血淋巴细胞(PBL)测试木瓜蛋白酶底物选择性的活性。木瓜蛋白酶的活性也在 4°C(整个器官储存的温度)下进行了测试。
结果:我们发现一定浓度的木瓜蛋白酶在 Belzer-UW 溶液中裂解测试底物的活性几乎与在蒸馏水中一样活跃。在蒸馏水中,如果孵育时间从 10 分钟延长至 3 小时,则木瓜蛋白酶在 4°C 温度下裂解测试底物的活性与其最佳温度 37°C 相同。如果木瓜蛋白酶溶解在 Belzer-UW 溶液中,这一发现也成立。在外周血淋巴细胞中,木瓜蛋白酶在 4°C 下与 37°C 下一样有效地裂解 HLA I 类蛋白,前提是孵育时间也延长至 3 小时。
结论:这些研究结果表明,木瓜蛋白酶靶向酶解供体 HLA I 类,在整个器官移植环境中具有潜在用途,在较低温度下以及在 Belzer-UW 溶液中激活和溶解时保留活性。 p>