淫羊藿苷通过抑制 MPTP 开放，改善 D-半乳糖诱导的神经元样 PC12 细胞损伤。
摘要来源：Curr Med Sci。 2024 年 6 月 20 日。Epub 2024 年 6 月 20 日。PMID：38900385
摘要作者：胡珊珊、王同耀、倪璐、胡凡新、岳博文、郑英、王天伦、Abhishek Kumar ，王艳艳，王金娥，周志勇
文章归属：胡珊珊
摘要：目的：淫羊藿苷（ICA）具有良好的神经保护作用，可以上调自然衰老大鼠神经元基础自噬。线粒体功能障碍与大脑衰老相关的神经退行性疾病有关。线粒体通透性转换孔（mPTP）的异常开放是线粒体功能障碍的关键因素，并与过度自噬有关。本研究旨在探讨ICA 通过在 D-半乳糖 (D-gal) 诱导的细胞损伤模型中阻断 mPTP 开放和下调自噬水平来防止神经元损伤。
方法：200 mmol/L D-gal作用大鼠嗜铬细胞瘤细胞（PC12细胞）48 h，建立神经元损伤细胞模型。在该细胞模型中，PC12细胞用不同浓度的ICA预处理24小时。 MTT用于检测细胞活力。衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色用于观察细胞衰老。 Western blot分析检测衰老相关蛋白（p21）、自噬标志物（LC3B、p62、Atg7、Atg5和Beclin 1）、线粒体裂变和融合相关蛋白（Drp1、Mfn2和Opa1）的表达水平，和线粒体自噬标记（Pink1 和 Parkin）。使用mRFP-GFP-LC3腺病毒检测自噬流的变化。透射法观察细胞内超微结构离子电子显微镜。采用免疫荧光法检测mPTP、线粒体膜电位（MMP）、线粒体活性氧（mtROS）和ROS水平。流式细胞仪检测ROS和凋亡水平。
结果：D-gal处理显着降低PC12细胞的活力，与对照组相比，SA-β-Gal阳性细胞明显增加。在D-gal刺激下，p21的表达显着上调。此外，D-gal刺激导致LC3B II/I比率升高和p62表达降低。同时，自噬体和自噬溶酶体显着增加，表明自噬水平异常激活。此外，在这种D-gal诱导的细胞损伤模型中，mPTP异常开放，ROS生成持续增加，MMP逐渐减少，细胞凋亡增加。 ICA有效改善线粒体d功能以防止 D-gal 诱导的细胞损伤和凋亡。它通过阻断 mPTP 的开放来强烈抑制过度自噬。 ICA 和 mPTP 抑制剂（环孢菌素 A）联合治疗并不能改善线粒体功能障碍。然而，ICA 和 mPTP 激活剂（氯尼达明）联合治疗会减弱保护作用。
结论：ICA 抑制激活过度自噬，从而通过阻断 mPTP 开放来改善线粒体功能障碍。