Piperlonguminine 通过抑制 TRPC6 减轻肾纤维化。
摘要来源：J Ethnopharmacol。 2023 年 9 月 15 日；313:116561。 Epub 2023 年 4 月 29 日。PMID：37121453
摘要作者：周雷、吴克涵、高宇轩、乔睿智、唐娜、殿超董小强、农秋娜、罗定强、肖千寒、范鑫、段启美、曹伟
文章来源：周雷
摘要：民族药理学相关性：六味地黄 (LWDH) 是一种经典处方，已被在中国用于治疗“肾阴虚”证已有1000多年的历史。最近的研究证实LWDH可以预防肾纤维化的进展。大量研究表明 TRPC6 在肾纤维化的发展中发挥着关键作用。由于LWDH的成分复杂及其备注
研究目的：本研究旨在从 LWDH 中鉴定选择性 TRPC6 抑制剂并评估其对肾纤维化的治疗效果。
材料与方法：采用计算机辅助药物设计筛选LWDH的生物活性成分，并通过微量热法检测其与人TRPC6蛋白的亲和力。构建了 TRPC6、TRPC3 和 TRPC7 过表达的 HEK293 细胞，并通过测量这些细胞中的 [Ca] 来确定化合物对 TRPC6 的选择性活性。为了建立肾纤维化的体外模型，用 TGF-β1 刺激人肾近端肾小管上皮 HK-2 细胞。然后通过检测相关指标来测试LWDH化合物对肾纤维化的治疗效果。d 蛋白质。在 HK-2 细胞中敲低 TRPC6，以研究 LWDH 活性成分对 TRPC6 的影响。最后建立肾纤维化单侧输尿管梗阻模型来测试治疗效果。
结果：来自数百名LWDH共获得64个口服生物利用度≥30%、药似指数≥0.18的活性成分。与TRPC6蛋白进行分子对接，共获得10个活性成分。其中，4个成分与TRPC6有亲和力。 Piperlonguminine (PLG) 与 TRPC6 具有最强的亲和力，并对 TRPC6 介导的 Caentry 具有阻断作用。 100 μM 的 PLG 对 TRPC1、TRPC3、TRPC4、TRPC5 或 TRPC7 介导的 Cainflux 进入细胞没有可检测到的抑制作用。体外结果表明，PLG 浓度依赖性地抑制 TGF-β1 诱导的 HK-2 细胞中 α-平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)、胶原蛋白 I、波形蛋白和 TRPC6 的异常高表达。康西斯特此外，PLG 也无法进一步抑制 TRPC6 敲低 HK-2 细胞中 TGF-β1 诱导的这些蛋白质生物标志物的表达。在体内，PLG剂量依赖性地降低肾纤维化小鼠的尿蛋白、血清肌酐和血尿素氮水平，并显着减轻肾组织纤维化和α-SMA、I型胶原、波形蛋白和TRPC6的表达。< /p>
结论：我们的结果表明，PLG 通过选择性抑制 TRPC6 具有抗肾纤维化作用。 PLG 可能是一种有前景的治疗肾纤维化的药物。