[流感病毒粒子作为蛋白水解酶的底物]。
摘要来源：Bioorg Khim。 2008年5月-6月；34(3):409-15。 PMID：18672693
摘要作者：Iu A Smirnova、LV Kordiukova、MV Serebriakova、I Iu Filippova、EN Lysogorskaia，LA Baratova
摘要：研究了各种酶对 A/Puerto Rico/8/34（H1N1 亚型）菌株的流感病毒颗粒的蛋白水解，以开发一种研究结构的方法。病毒粒子环境的基本蛋白质成分的组织和相互作用：血凝素（HA）、跨膜同源三聚体糖蛋白和基质蛋白 M1 形成脂质膜下的一层。在测试的蛋白水解酶和酶制剂（嗜热菌蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶嘉士伯、链霉蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶）中，半胱氨酸蛋白酶菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶以及酶制剂n链霉蛋白酶有效地删除了HA胞外域，而胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶Carlsberg仅删除了其中的一部分。 MALDI TOF 质谱分析使我们能够定位各种酶制剂水解 HA 的位点。菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和链霉蛋白酶在位于跨膜结构域 (HA2 185-211) 之前的 K177 残基之后分裂多肽链。嘉士伯枯草杆菌蛋白酶在其他邻近点处水解肽键：L178（碱性位点）或 V176 之后。通过半胱氨酸蛋白酶 Glp-Phe-Ala-pNA 的高度特异性显色底物测量的菠萝蛋白酶的水解活性在 5 mM β-巯基乙醇存在下几乎比在 50 mM 存在下高三倍。然而，HA高活性酶和低活性酶完全去除HA、HA和低活性酶的外结构域需要相同的时间间隔。在没有还原剂的情况下，菠萝蛋白酶去除 HA 的速度稍微慢一些并伴有蛋白质 Ml1 的显着断裂。研究了半胱氨酸蛋白酶特异性抑制剂反式环氧琥珀酰-L-亮酰胺基)丁烷(E-64)和HgCl2对菠萝蛋白酶水解HA和M1蛋白的作用。