[叶酸通过DNA甲基化减轻同型半胱氨酸诱导的大鼠心肌细胞损伤]。
摘要来源:西宝与分子免疫学杂志。 2019 年 7 月;35(7):625-630。 PMID:31537248
摘要作者:于浩、李沛沛、宁彦、张正军
文章所属单位:于郝
摘要:目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对体外培养的心肌细胞的影响,并分析叶酸在DNA甲基化中的作用,探讨叶酸对Hcy过程的保护作用及机制。 H9C2 心肌细胞的暴露。方法用不同浓度(0、0.5、1、2)mmol/L的Hcy处理H9C2细胞24 h。通过CCK-8测定法测试细胞活力。通过流式细胞术检测细胞凋亡。 H9C2细胞分为2 mmol/L Hcy组、0.1 mmol/L叶酸联合2 mmol/L Hcy组、0.1 mmol/L叶酸组和DMSO对照组。上述相应处理持续24小时。然后我们检测细胞活力和凋亡。采用MmethylFlash ELISA试剂盒测定总DNA甲基化水平。通过实时定量PCR和Western blot分析检测DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA和蛋白表达。结果不同浓度Hcy作用24 h后H9C2细胞数量随着Hcy浓度的增加而减少。与对照组相比,2 mmol/L Hcy治疗组细胞活性和凋亡均减少,且叶酸联合Hcy治疗组细胞数量明显高于Hcy治疗组。与其他组相比,Hcy治疗组总凋亡率升高,甲基化水平明显降低,叶酸联合Hcy治疗组DNA甲基化水平升高。 DNMT1 mRNA 水平仅在叶酸治疗组中显着升高,而DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的水平没有显着变化。结论叶酸可减轻Hcy通过DNA甲基化对心肌细胞的损伤。