叶下珠提取物对拉米夫定耐药乙型肝炎病毒体外复制的抑制作用。
摘要来源：BMC 补体 Altern Med。 2015 年；15:255。 Epub 2015 年 7 月 29 日。PMID：26220282
摘要作者：Jaesung Jung、Nam Keun Kim、Sun Park、Ho-Joon Shin、Seong Gyu Hwang、 Kyongmin Kim
文章归属：Jaesung Jung
摘要：背景：慢性肝炎的长期治疗B (CHB) 与核苷（酸）类似物会导致聚合酶 (P) 基因发生突变的耐药乙型肝炎病毒 (HBV) 的出现。叶下珠提取物具有抗乙肝病毒活性；然而，其对拉米夫定（LMV) 耐药突变体尚未经过检查。
方法：携带 LMV 耐药突变体（rtM204I、rtM204V 和 rtM204S）的 HBV ) 在 P 基因的 YMDD ((203) 酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(206)) 反向生成了转录酶（RT）活性位点并检查了它们对韩国叶下珠提取物的敏感性。使用 Southern 印迹和实时 PCR 来确定抑制 HBV DNA 合成 50% 和 90%（分别为 EC50 和 EC90）所需的植物提取物浓度。采用酶联免疫吸附测定法测定 HBV 表面抗原 (HBsAg) 和 HBV 核心抗原 (HBcAg) 分泌的 EC50，并在 3-(4,5-二甲基噻唑-) 中测定提取物的 50% 细胞毒性浓度。 2-基)-2,5-二苯基溴化四唑测定。采用实时RT-PCR检测mRNA表达水平。
结果：细胞内表达经叶下珠提取物处理后，HBV WT 或突变体转染的 HepG2 细胞中的 HBV DNA 减少。 HBsAg 和 HBcAg 的分泌量也呈剂量依赖性下降。叶下珠提取物可能通过激活细胞外信号调节激酶，诱导 HBV WT 转染的 HepG2 细胞中干扰素 β (IFN-β)、环氧合酶 2 (COX-2) 和白细胞介素 6 (IL-6) mRNA 表达。 c-jun N-末端激酶和视黄酸诱导基因-I、Toll 样受体 3、骨髓分化初级反应基因的诱导88和/或肿瘤坏死因子受体相关因子6基因表达。在没有提取物或仅暴露细胞提取物的情况下进行 HBV 转染不会触发这些信号级联反应。
结论：叶下珠提取物通过复制含有 HBV 野生型和 LMV 抗性突变体的细胞，抑制 HBV DNA 合成以及 HBsAg 和 HBcAg 分泌，可能是通过诱导表达IFN-β、COX-2 和 IL-6 离子。这些数据表明，叶下珠提取物可能可作为治疗耐药慢性乙型肝炎患者的替代治疗剂。