小檗碱对山羊TLR4-NFκB信号通路和NLRP3炎症小体激活的影响。
摘要来源：中华整合医学杂志。 2022 年 9 月 20 日。Epub 2022 年 9 月 20 日。PMID：36125615
摘要作者：党万泰、徐丹、周景国
文章归属：万泰党
摘要：目的：确定小檗碱的作用（ BBR) 对患者 Toll 样受体 4 (TLR4)、核因子 (NF)κB (NF-κB) 信号传导和 NLRP3 炎症小体激活的影响患有痛风。
方法：分别从24个急性期（AP）和41个非急性期（NAP）原发性痛风患者中获取外周血单核细胞（PBMC） ，以及 30 名健康对照 (HC)。 TLR4、NF-κB (p65)、NLRP3、凋亡相关斑点蛋白通过定量逆转录聚合酶链式反应测定PBMC中含有CARD（PYCARD）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-1（CASP1）和白介素-1β（IL-1β）的mRNA表达水平。 TLR4、骨髓分化因子 88 (MyD88)、NF-κB (p50/65)、κ B 激酶抑制剂 α/β (IKKα/β)、NF-κB 抑制剂 α (IKBα)、磷酸-IKKα/ 的蛋白水平通过蛋白质印迹法监测 β (p-IKKα/β)、NLRP3、PYCARD 和 CASP1。使用酶联免疫吸附测定（ELISA）测量血清IL-1β蛋白水平。此外，使用尿酸钠（MSU，100 µg/mL）、0.1% 二甲基亚砜、25 µmol/L BBR 和 10 、25 和 50 µmol/L BBR+100 µg/mL MSU 在不同时间段内。采用ELISA法检测细胞培养上清液中IL-1β、IL-18的蛋白水平，以及TLR4、MyD88、NF-κB(p50/p65)、IKKα/β、IκBβ、通过Western blotting分析巨噬细胞中的p-IKKα/β、NLRP3、PYCARD和CASP1。
结果：(1) AP 中 PBMC 中的 TLR4、NF-κB (p65)、PYCARD、CASP1 和 IL-1β mRNA 水平显着较高组优于 HC 组（P<0.05）。 AP组和NAP组PBMCs中NLRP3 mRNA表达水平显着低于HC组（P<0.05，P<0.01）。 (2)PBMC中TLR4、IKKβ、MyD88、NF-κB、p-IKKα/β、PYCARD、CASP1的蛋白水平显着升高，而IκBα、IKKα、NLRP3的蛋白水平在PBMC中显着降低。 AP组优于HC组(P<0.05或P<0.01)。 (3)AP组和NAP组血清IL-1β蛋白水平显着高于HC组(P<0.01)。 (4) 25和50 µmoL/L BBR组MSU刺激3和6 h的PBMC培养上清液中IL-1β蛋白水平显着低于MSU组(P<0.01)。 (5)BBR组MSU刺激3、6 h巨噬细胞培养上清液中IL-1β、IL-18蛋白水平也显着低于MSU组(P<0.01)。 (6) MSU刺激的巨噬细胞间TLR4、MyD88、NF-κB(p50、p65、p105)、IKKα/β、p-IκBα、p-IKKα/β、PYCARD和CASP1的蛋白水平存在显着差异。 BBR 组与 MSU 组相比 0.5 和 6 h（P<0.05 或P<0.01）。
结论：MSU 晶体激活 TLR4-NFκB 信号传导和 NLRP3 炎症小体可促进痛风炎症的进展。 BBR 可改善痛风炎症，其机制与其调节 TLR4-NF-κB 信号传导和 NLRP3 炎症小体表达有关。