摘要标题:

接触植物凝集素后肠道上皮细胞中热休克蛋白的水平降低。

摘要来源:

Gut.2000 May;46(5 ):679-87。 PMID:10764712

摘要作者:

J H Ovelgönne、J F Koninkx、A Pusztai、S Bardocz、W Kok、S W Ewen、H G Hendriks, J E van Dijk

摘要:

 背景:肠上皮的肠上皮细胞经常暴露于膳食来源的潜在有害物质,例如凝集素。这种上皮表达的热休克蛋白(HSP)可能是肠上皮细胞为处理肠腔中有害成分而开发的保护机制的一部分。目的:研究凝集素 PHA(一种来自菜豆(Phaseolus vulgaris)的凝集素)和 WGA(一种来自小麦胚芽(Triticum aestivum)的凝集素)是否可以改变肠上皮的热休克反应细胞并确定这种效应的程度。方法:使用单克隆抗体筛选 PHA 和 WGA 喂养大鼠的空肠组织切片中 HSP70、HSP72 和 HSP90 的表达。分化的 Caco-2 细胞(绒毛肠上皮细胞的体外对应物)暴露于 100 微克/毫升的 PHA-E(4) 或 WGA 48 小时,并通过 [2-( 14)C]胸苷和L-[甲基-(3)H]甲硫氨酸。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹分析暴露于凝集素的这些细胞中 HSP60、HSP70、HSP72 和 HSP90 以及结合蛋白 (BiP) 的相对浓度。为了确定暴露于凝集素的分化 Caco-2 细胞是否仍能够产生热休克反应,这些细胞接受热休克(40 摄氏度、41 摄氏度和 42 摄氏度)一小时,并允许恢复六小时。 37 摄氏度下持续数小时。在热休克和恢复期间,继续暴露于凝集素。右结果:在喂食乳清蛋白(对照)的大鼠的肠细胞中测量了 HSP 的组成水平,正如从该组织的功能中可以预期的那样。然而,在喂食 PHA 和 WGA 的大鼠中,发现针对几种 HSP 的抗体与肠上皮的结合显着下降。这些结果通过使用暴露于 PHA-E(4) 和 WGA 的分化 Caco-2 细胞的体外实验得到证实。然而,暴露于凝集素后,这些细胞仍然能够进行热诱导的热休克蛋白合成,并且总蛋白合成没有受损,表明在非应激细胞中HSP合成受到特异性抑制。结论:我们得出的结论是,PHA 和 WGA 降低了大鼠肠道和肠上皮细胞样 Caco-2 细胞中应激蛋白的水平,使这些细胞无法很好地抵御肠腔中潜在有害物质的侵害。

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研究类型 : 体外研究
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