黄芩提取物和黄酮类化合物的抗纤维化活性：比较蛋白质组学揭示独特且共同的机制。
摘要来源：植物药。 2022 年 6 月；100:154049。 Epub 2022 年 3 月 19 日。 PMID：35397287
摘要作者：周书君、尹晓科、袁军、梁志涛、宋景正、李云霞、程彭，Peter J Hylands，赵中振，徐启和
文章所属单位：周树君
摘要：背景：<黄芩（SR），黄芩的根，SR黄酮类化合物具有抗纤维化活性。然而，SR 水提取物 (SRA)、SR 甲醇提取物 (SRM) 和五种主要成分之间的区别仍然模糊。主要 SR 黄酮类化合物（黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素和木木苷），哪些是最有前途的抗纤维药物及其机制。
目的：< /span>比较 SR 提取物和黄酮类化合物的抗纤维化活性，以及蛋白质组特征在 TGF-β1 诱导的 NRK-49F 肾成纤维细胞纤维化体外模型中，选择了 SR 提取物和类黄酮，与抗纤维化阳性对照 IN1130 磷酸盐（缩写为 IN1130）进行比较。
< span class="sub_abstract_label">方法：基于同量异位标记的质谱法用于蛋白质组学研究。使用基因本体注释富集、蛋白质-蛋白质相互作用网络分析和通路分析进一步分析差异表达的蛋白质。通过酶联免疫吸附测定 (ELISA) 验证选定的目标蛋白。
结果：黄芩素 wa是药毒比最好的SR黄酮类化合物。 SRM 含有比 SRA 多 8 倍的黄酮类化合物，并且抗纤维化能力更强。对经 TGF-β1（含或不含黄芩素（40 和 80 µM）、SRM（40 和 80 µg/ml）和 IN1130（1 µM）处理的细胞进行蛋白质组分析表明，黄芩素、SRM 和 IN1130 均抑制 TGF-β1 诱导的细胞裂解物中的核糖体蛋白，虽然有黄芩素和SRM，但不是IN1130，调节细胞内溶酶体途径；分泌组学分析表明，40 和 80 μg/ml SRM 和 80 μM 黄芩素（而非 IN1130 和 40 μM 黄芩素）会增加条件培养基中的核糖体蛋白，而只有黄芩素调节溶酶体途径。 ELISA 验证了分泌组学结果，黄芩素、SRM 和 IN1130 抑制 TGF-β1 诱导的 PAI-1 (Serpine1)、Plod2、Ctgf (Ccn2)、Ccl2 和 Ccl7；黄芩素和 IN1130（而非 SRM）可逆转 TGF-β1 诱导的 Cyr61 (Ccn1) 和 Tsku；仅黄芩素可逆转 TGF-β1 对 Mmp3 的抑制；仅 IN1130 逆转了 TGF-β1 抑制的 Nov (Ccn3）。 ELISA 验证了细胞裂解物蛋白质组学结果，表明黄芩素、SRM 和 IN1130 均能逆转 TGF-β1 诱导的 Enpp1；仅 IN1130 逆转 TGF-β1 诱导的 Impdh2 和 Sqstm1 以及 TGF-β1 抑制的 Aldh3a1。黄芩素和SRM诱导Ccdc80，而只有黄芩素诱导Tfrc。
结论：黄芩素、SRM和IN1130抑制TGF-β1-通过调节重叠的蛋白质靶标和生物途径诱导肾成纤维细胞纤维化。我们的研究结果提供了对共享的、药物和剂量特异性的药理和毒理机制的全面看法，并为进一步研究和开发更有效、更安全的抗纤维药物提供了宝贵的资源。