通过氧化还原荧光测定法证明萝卜硫素可保护视网膜色素上皮细胞免受氧化应激。
摘要来源:Invest Ophasemol Vis Sci。 2008 年 6 月;49(6):2606-12。 PMID:18515589
摘要作者:Marisol del V Cano、Johann M Reyes、Choul Y Park、Xiangqun Gau、Keisuke Mori、Roy S Chuck、Peter L Gehlbach
文章所属机构:约翰霍普金斯大学医学院眼科,巴尔的摩,马里兰州 21287,美国。
摘要:目的:量化氧化剂挑战对眼睛的影响使用显微自发荧光光谱法测定成人视网膜色素上皮细胞的氧化还原状态,并确定是否用异硫氰酸萝卜硫素处理保护这些细胞免受氧化应激。方法:H2O2 和叔丁基过氧化氢在 ARPE-19 细胞中诱发氧化应激。减少通过 366 nm 激发并测量 450 nm 荧光来评估烟酰胺核苷酸 NAD(P)H。通过 460 nm 激发并测量 540 nm 荧光来评估氧化黄素蛋白。这些测量值的比率作为细胞氧化还原状态的指标。结果:暴露于氧化剂后,氧化还原比和细胞活力以剂量依赖性方式下降。用萝卜硫素处理的 ARPE-19 细胞保持显着较高的氧化还原比和细胞活力。暴露于 0.64 mM H2O2 后,萝卜硫素处理的细胞的比率为 2.64 +/- 0.19,而未处理的细胞为 1.77 +/- 0.16 (P = 0.001)。在 1.2 mM H2O2 下,萝卜硫素处理细胞的氧化还原比为 2.30 +/- 0.18,而未处理细胞的氧化还原比为 1.76 +/- 0.13 (P = 0.02)。用叔丁基过氧化氢损伤后观察到类似的结果。结论:氧化还原荧光测定法提供了活细胞氧化还原状态的定量信息。萝卜硫素保护 ARPE-19 ce通过诱导抗氧化第 2 相基因来防止氧化损伤。本研究的结果描述了一种评估活细胞抗氧化作用的有用方法,并支持第 2 相基因诱导作为黄斑变性和氧化损伤引起的疾病的潜在治疗策略。