间充质干细胞来源的外泌体改善视网膜色素上皮细胞的蓝光刺激和 VEGF 依赖性视网膜激光损伤机制。
摘要来源:Int J Ophamol。 2018;11(4):559-566。 Epub 2018 年 4 月 18 日。PMID:29675371
摘要作者:何光辉、张伟、马英学、杨静、陈力、宋健、陈松
文章来源:何光辉
摘要:目的:观察效果人脐带血间充质干细胞(hUCMSC)来源的外泌体对蓝光损伤的人视网膜色素中血管内皮生长因子-A(VEGF-A)表达的影响上皮(RPE)细胞和激光诱导d 大鼠脉络膜新生血管(CNV)。
方法:从hUCMSCs中分离出外泌体,并通过透射电子显微镜和Western blotting进行表征印迹。 MSC 衍生的外泌体与暴露于蓝光的 RPE 细胞一起培养。分别通过实时聚合酶链式反应(PCR)和Western blot测定VEGF-A的mRNA和蛋白表达。采用免疫荧光法检测VEGF-A的表达水平。我们在玻璃体内注射不同剂量的间充质干细胞衍生的外泌体,观察并比较它们在激光诱导视网膜损伤小鼠模型中的效果。采用苏木精-伊红(HE)染色和眼底荧光素血管造影检查大鼠CNV的组织学结构。免疫组化检测VEGF-A的表达。
结果:外泌体表现出典型的特征形态(杯状)和尺寸(直径在 50 至 150 nm 之间)。外泌体标记物 CD63 和 hUCMSC 标记物 CD90 显示出强劲的存在。 MSC 衍生的外泌体下调 mRNA(Exo-L:=6.485、7.959、9.286;Exo-M:=7.517、10.170、13.413;Exo- H:=10.317, 12.234、14.592、<0.05)和蛋白(Exo-L:=2.945、4.477、6.657;Exo-M:=4.713、6.421、8.836;Exo-H:=6.539、12.194、12.783;<0.05)VEGF-的表达一个在蓝光刺激后的RPE细胞,我们发现MSCs来源的外泌体减少了损伤,明显下调了VEGF-A(Exo-H:=0.957,1.382;<0.05),并逐渐改善了CNV的组织学结构,以获得更好的视觉效果。功能(Exo-L:0.346,Exo-M:3.382,Exo-H: 8.571;<0.05)。
结论:MSC 衍生的外泌体可改善 RPE 细胞和激光诱导视网膜的蓝光刺激VEGF-A 损伤下调。