鞣花酸代谢物尿石素 A 和 B 对体外子宫内膜异位细胞的生长、粘附、运动和侵袭有不同影响。
摘要来源：Hum Reprod。 2021 年 5 月 17 日；36(6):1501-1519。 PMID：33748857
摘要作者：Barbara McCormack、N Maenhoudt、V Fincke、A Stejskalova、B Greve、L Kiesel、G F Meresman, H Vankelecom, M Götte, R I Barañao
文章隶属关系：Barbara Mc Cormack
摘要：研究问题： 植物源性抗氧化剂化合物尿石素 A (UA) 和 B (UB) 对真菌的生长和致病特性有何影响？体外子宫内膜异位症模型？
总结答案：两种尿石素通过差异影响，对与子宫内膜异位症发展相关的细胞行为产生抑制作用生长，子宫内膜异位症细胞在体外的粘附、运动和侵袭。
已知信息：子宫内膜异位症是最常见的疾病之一育龄妇女的良性妇科疾病，定义为子宫腔外存在子宫内膜组织。由于目前的药物疗法与干扰生育能力的副作用有关，我们的目标是寻找使用天然化合物的替代疗法，这些化合物可以长期服用且副作用良好。
研究设计、规模、持续时间：来自 6 名接受腹腔镜检查良性病变并进行组织学检查的患者的原代子宫内膜异位基质细胞的体外培养物确诊子宫内膜异位症；利用永生化子宫内膜基质（St-T1b）和子宫内膜异位上皮细胞（12Z）评估UA和UB对子宫内膜异位细胞特性的影响rties。结果在一名患者的 12Z 和原代子宫内膜异位基质细胞的三维 (3D) 体外共培养球体以及来自 3 名患有子宫内膜异位症的独立捐赠者的类器官中得到验证。
参与者/材料、环境、方法：对细胞生长的影响通过以下方法测量用于测量细胞代谢活性作为细胞活力指标的非放射性比色测定（MTT 测定）和对原代培养物、St-T1b 和 12Z 进行流式细胞术细胞周期测定。在细胞系中评估细胞凋亡分析以及对体外粘附、迁移和侵袭的影响。此外，对原代培养物、St-T1b 和 12Z 进行实时定量逆转录聚合酶链反应 (RT-qPCR) 测定，以评估与蛋白水解相关的因素（基质金属蛋白酶 2、3 和 9-MMP2、 MMP3、MMP9- 和金属蛋白酶组织抑制剂 -TIMP-1-）、细胞骨架调节剂（Ras 相关 C3 肉毒毒素底物 1 -RAC1-、Rho 相关卷曲螺旋含有蛋白激酶 2 -ROCK2-）和细胞粘附分子（Syndecan 1 -SDC1-、整合素 α V-ITGAV-） 。最后，通过形成、活力和药物筛选分析评估了尿石素对球体和类器官的影响。
主要结果和机会的作用：
主要结果和机会的作用：40 μM UA 和 20 μM UB 使原代子宫内膜异位细胞培养物中的细胞增殖显着降低（分别为 P < 0.001 和 P < 0.01）和 St-T1b 细胞系（分别为 P < 0.001 和 P < 0.05）。在St-T1b中，UA的平均半数抑制浓度(IC50)为39.88μM，而UB的平均IC50为79.92μM。 40μM UA 和 20μM UB 均导致细胞周期 S 期细胞数量增加（分别为 P<<0.01 和 P<0.05）。相同浓度的UA也增加了凋亡ST-的百分比t1b 细胞（P<0.05），而两种尿石素在 24 小时后均减少细胞迁移（P<0.001）。仅添加 5 μM UB 就会减少 St-T1b 贴壁细胞的数量。用40μM UA处理细胞后，TIMP-1表达上调（P<0.05）。对于12Z子宫内膜异位细胞系，仅40 μM UA会降低增殖作用（P < 0.01）；而40μM UA和20μM UB均导致G2/M期细胞数量增加（分别为P<0.05和P<0.01）。在该细胞系中，UA 的平均 IC50 为 40.46μM，而 UB 的平均 IC50 为 54.79μM。 UB降低细胞迁移（P < 0.05），并减少贴壁细胞数量（P < 0.05）。 40μM UA 和 20μM UB 均显着降低了这些细胞的细胞侵袭能力；当用 40μM UA 和 10μM UB 处理细胞时，一些基因发生了改变。 UA下调MMP2表达（P < 0.001），下调MMP3（UA P < 0.001和UB P < 0.05）和MMP9表达（P < 0.05，均为P < 0.05）。由两种尿石素控制。此外，UA显着下调ROCK2（P<0.05），而UB治疗与RAC1下调相关（P<0.05）。最后，基质粘附受体和信号（共）受体 SDC1 和 ITGAV 在 UA 或 UB 治疗后下调（两种情况下分别为 P<0.01 和 P<0.05）。关于尿石素对 3D 模型的影响，我们发现它们显着降低了子宫内膜异位球体的活力（80 μM UA 和 UB：P < 0.05 均）并影响其面积（40 μM UA：P < 0.05 和 80 µM UA：P < 0.01)和完整性（40 μM UA 和 UB：P < 0.05，80 μM UA 和 UB：P < 0.01）。另一方面，UA和UB显着抑制类器官的发育/生长（40和80μM UA：P<0.0001均；40μM UB：P
大规模数据：不适用。
< p>限制、注意原因：这项研究是在体外进行的子宫内膜异位症模型。研究结果的更广泛意义：这些体外结果为受这些化合物影响的致病途径提供了新的见解并将其标记为治疗子宫内膜异位症的潜在新治疗策略。
研究资助/竞争利益：本研究由欧盟 MSCA-RISE-2015 项目 MOMENDO (691058) 资助。作者没有需要声明的利益冲突。