叶黄素通过调节视网膜色素上皮 (ARPE-19) 细胞内蛋白激酶的激活,逆转高血糖介导的 Nrf2 易位阻断。
摘要来源:J Cell Commun信号。 2019 年 12 月 16 日。Epub 2019 年 12 月 16 日。PMID:31820335
摘要作者:Arpitha Haranahalli Shivarudrappa,Ganesan Ponesakki
文章隶属:Arpitha Haranahalli Shivarudrappa
摘要:糖尿病视网膜病变 (DR) 是工作成年人获得性失明的主要原因。视网膜色素上皮(RPE)构成外部血-视网膜屏障,在患有糖尿病的人类和动物中受到极大影响。糖尿病人群血清和视网膜中的叶黄素水平较低,以及补充类胡萝卜素对糖尿病视网膜病变患者的有益作用引起了研究叶黄素对高血糖的保护作用的兴趣mia 介导的 ARPE-19 细胞氧化应激和抗氧化防御系统的变化。进行 WST-1 测定来分析葡萄糖和叶黄素对 ARPE-19 活力的影响。通过 DCF(二氯荧光素)测定法测量细胞内氧化应激,使用 JC-10 MMP 测定试剂盒监测线粒体膜电位(MMP),并使用 GSH/GSSG 比率检测试剂盒检查 GSH 水平。氧化应激标记物、蛋白质羰基和丙二醛分别使用2,4-二硝基苯肼和2-硫代巴比妥酸进行分光光度法测量。通过蛋白质印迹法对 ARPE-19 中内源抗氧化酶和调节蛋白的表达进行定量。通过免疫荧光染色检查Nrf2蛋白的定位。结果表明,叶黄素(高达 1.0 μM)不会影响在正常和高葡萄糖条件下生长的 ARPE-19 的活力。叶黄素治疗可阻断高葡萄糖介导的内切酶升高ARPE-19细胞中细胞内ROS、蛋白质羰基和丙二醛含量。在高葡萄糖条件下生长的 ARPE-19 中观察到的 MMP 和 GSH 水平降低可通过叶黄素处理得到恢复。此外,叶黄素可以保护高葡萄糖介导的氧化还原敏感转录因子 Nrf2 和抗氧化酶 SOD2、HO-1 和过氧化氢酶的下调。叶黄素的这种保护作用与 Nrf2 的激活核转位有关,而 Nrf2 又与 Erk 和 AKT 等调节蛋白的激活增加有关。我们的研究表明,提高视网膜中叶黄素的浓度可以保护 RPE 免受糖尿病相关损伤。