柚皮素上调 GTPCH1/eNOS 以改善高糖诱导的视网膜内皮细胞损伤。
摘要资料来源：Exp Ther Med。 2022 年 6 月；23(6):428。 Epub 2022 年 5 月 5 日。PMID：35607381
摘要作者：薛冰、王宇
文章所属单位：Bing薛
摘要：糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病的微血管并发症，而视网膜内皮细胞（REC）功能障碍被认为是DR的主要病理过程。柚皮素是一种天然黄酮类化合物，具有针对多种类型的内皮细胞损伤的治疗潜力。然而，据我们所知，之前尚未研究过它对 REC 损伤的影响。因此，本研究的目的是研究柚皮素对高糖 (HG) 诱导的 REC 损伤的影响并评估其潜在机制。为了建立视网膜损伤模型，用 30 mM 葡萄糖处理人类 (H)REC。使用细胞计数试剂盒8检测和TUNEL染色分别评估柚皮素对细胞增殖和凋亡的影响。分别使用 ROS 检测试剂盒和 ELISA 测量活性氧 (ROS) 水平和四氢生物蝶呤 (BH4)（内皮一氧化氮合酶 (eNOS) 的必需辅助因子）浓度。通过逆转录定量PCR检测三磷酸鸟苷环水解酶-1（GTPCH1）干扰质粒对HRECs的转染效率。通过蛋白质印迹分析测定Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)、eNOS和GTPCH1的蛋白表达水平。与单独 HG 诱导组相比，柚皮素联合治疗可抑制 HG 诱导的 HREC 细胞凋亡，且呈剂量依赖性ner，增加了增殖相关蛋白 Ki67 和 PCNA 的表达水平，并有效降低了细胞内 ROS 水平。此外，柚皮素上调 GTPCH1/eNOS 信号传导并促进 BH4 的释放。然而，GTPCH1 敲低部分逆转了柚皮素对 HG 诱导的 HREC 损伤的改善作用。综上所述，本研究提示柚皮素能有效抑制HG诱导的HREC凋亡和细胞内氧化应激，其机制可能与柚皮素介导的GTPCH1/eNOS上调有关。