莲心碱通过调节miR-17-5p/核因子E2相关因子2轴抑制糖尿病肾病进展。
摘要来源：中医药杂志。 2024 年 2 月；44(1):44-53。 PMID：38213238
摘要作者：黄红梅、杨茂君、李婷、王丹丹、李英、唐晓池、袁璐、顾石、徐宇勇
文章来源：黄红梅
摘要：目的：研究莲心碱（Nef）的作用) 研究糖尿病肾病(DN)，并基于miRNA调控理论探讨Nef在DN中的作用机制。
方法：构建DN小鼠模型并用Nef处理。采用试剂盒测定小鼠血清肌酐（Crea）、血尿素（UREA）和尿白蛋白，观察肾脏组织病理学变化和纤维化情况通过苏木精-伊红染色和马森染色。通过酶联免疫吸附测定（ELISA）测定肾组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。采用Western blotting检测肾组织中核因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素加氧酶1（HO-1）信号通路相关蛋白的表达情况。采用定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测肾组织中miR-17-5p的表达。随后，通过高糖培养人系膜细胞（HMC）构建DN体外模型，用miR-17-5p模拟物转染细胞和/或用Nef处理细胞，并使用qRT-PCR检测细胞miR-17表达，流式细胞术检测细胞凋亡，ELISA 检测细胞 SOD、MDA 和 GSH-Px 活性，Western blot 检测 Nrf2/HO-1 信号通路相关蛋白表达，以及双重检测荧光素酶报告基因检测以验证焦油获取 Nrf2 和 miR-17-5p 之间的关系。
结果：服用 Nef 显着降低血糖水平， Crea 和 UREA 以及 miR-17-5p 的表达，改善肾脏组织病理学和纤维化，显着降低 MDA 水平，升高 SOD 和 GSH-Px 活性，并激活DN 小鼠肾组织中 Nrf2 的表达。 Nrf2 是 miR-17-5p 的转录后靶标。在转染 miR-17-5p 模拟物的 HMC 中，Nrf2 的 mRNA 和蛋白水平显着受到抑制。此外，miR-17-5p过表达和Nef干预导致HMCs高糖诱导的细胞凋亡和MDA水平显着增加，HO-1和Nrf2蛋白表达显着降低。
结论：总的来说，这些结果表明 Nef 对 DN 有改善作用，其机制可能是通过 miR-17-5p/Nrf2通路。