天然生物碱骆驼蓬碱通过 PKA 介导的泛素蛋白酶体系统激活促进 α-突触核蛋白降解

天然生物碱骆驼蓬碱通过 PKA 介导的泛素-蛋白酶体系统激活促进 α-突触核蛋白降解。

植物医学。 2019 年 8 月；61:152842。 Epub 2019 年 1 月 30 日。PMID：31048127

蔡翠赞、周鹤峰、袁宁宁、吴明月、李明源、任娇艳、苏焕兴、金- 陆健、陈秀平、李敏、谭洁琼、陆嘉宏

蔡翠赞

背景：帕金森病（PD）是一种年龄依赖性进行性运动障碍，其特征是黑质纹状体多巴胺能神经元的严重和选择性丧失。黑质中<α-突触核蛋白（<α>-syn）阳性蛋白聚集体的积累是PD的病理标志，表明蛋白周转缺陷与PD病理有关

目的：本研究旨在鉴定可以减轻神经元中<α>-syn积累的神经保护化合物细胞并剖析其潜在机制。

方法：通过斑点印迹分析进行高通量筛选。通过蛋白质印迹评估候选化合物对不同形式的α-syn的降解。检查自噬溶酶体途径和泛素蛋白酶体系统以剖析降解途径。通过细胞UPS底物降解测定和生化蛋白酶体活性测定来评估UPS活性。进行Q-PCR来测试不同蛋白酶体亚基的mRNA水平。此外，通过LDH测定和PI染色测试候选化合物的神经保护作用。

结果：通过高通量筛选，去氢骆驼蓬碱已鉴定作为有效的α-syn降低化合物。进一步证实了去氢骆驼蓬碱对不同形式的α-syn降解的时间依赖性和剂量依赖性作用。骆驼蓬碱能显着促进 UPS 底物 GFP-CL1、Ub-R-GFP 和 Ub-G76V-GFP 的降解，并激活细胞蛋白酶体活性。从机制上讲，去氢骆驼蓬碱可显着增强 PKA 磷酸化，从而增强蛋白酶体亚基 PSMD1 的表达。 PKA抑制剂阻断去氢骆驼蓬碱激活UPS、上调PSMD1和促进α-syn降解的作用，表明去氢骆驼蓬碱通过PKA激活增强UPS功能。此外，去氢骆驼蓬碱通过 UPS 依赖性方式有效挽救了由 -syn 过度表达引起的细胞死亡。

结论： 去氢骆驼蓬碱作为一种新型蛋白酶体增强剂，有望开发成针对与 UPS 功能障碍和蛋白异常相关的神经退行性疾病的治疗剂ins积累。