绿茶成分表没食子儿茶素-3-没食子酸酯通过减少转移性肝细胞癌细胞系中 mRNA 半衰期来降低骨桥蛋白的表达。
摘要来源：外科手术。 2015 年 7 月 17 日。Epub 2015 年 7 月 17 日。PMID：26189955
摘要作者：Matthew A C Zapf、Anai N Kothari、Cynthia E Weber、Matthew L Arffa、Phillip Y Wai、Joseph Driver、Gopal N Gupta、Paul C Kuo、Zhiyong Mi
文章归属：Matthew A C Zapf
摘要：简介：骨桥蛋白 (OPN) 介导转移和侵袭肝细胞癌（HCC）。表没食子儿茶素-3-没食子酸酯 (EGCG) 存在于绿茶中，可在体外抑制 HCC 肿瘤生长。我们试图研究 EGCG 在调节转移性 HCC 细胞系中 OPN 中的作用。
方法：实验l HCC细胞系包括表达高水平OPN的HepG2和MHCC-97H HCC细胞，以及表达较低水平OPN的Hep3B细胞。在使用酶联免疫吸附测定和逆转录聚合酶链式反应测量 OPN 之前，用 EGCG (0.02-20 µg/mL) 处理细胞。划痕试验测量细胞迁移。 EGCG 处理后使用染色质 IP 测定法评估 OPN 启动子与 RNA pol II 的结合。使用含有人 OPN 启动子各种缺失片段的荧光素酶报告质粒研究 OPN 的转录调控。使用放线菌素 D 测量 OPN mRNA 的半衰期。
结果：MHCC-97H 和 HepG2 的治疗含有 2 μg/mL 和 20 μg/mL EGCG 的细胞导致 OPN 分泌蛋白水平降低约 6 倍和约 90 倍（所有 P < .001）。当 EGCG 浓度为 0.2-20 μg/ml 时，OPN mRNA 降低（所有 P < .001）。 3-(4, 5-二甲基噻唑基-2)-2,5-二苯基溴化四唑（即MTT）测定表明OPN表达的差异并不是由于HCC细胞系的活力造成的。启动子测定和染色质免疫沉淀分析显示 EGCG 对 OPN 的转录调控没有影响。转录后，EGCG 将 OPN mRNA 的半衰期从 16.8 小时（95% 置信区间 9.0-125.1）缩短至 2.5 小时（95% 置信区间 2.1-3.2）（P < .001）。 EGCG 处理的细胞在 24 小时（8.0 ± 2.4% vs 21.2 ± 10.8%，P <.01）和 48 小时（13.2 ± 3.6% vs 53.5 ± 19.8%，P <.001）时迁移减少。
结论：我们提供的证据表明，EGCG 通过缩短 MHCC 中 OPN mRNA 的半衰期来降低 OPN mRNA 和分泌的 OPN 蛋白水平。 97H 细胞。 EGCG 对于 HCC 患者的可转化性是有希望的，因为 EGCG 是一种廉价、易于获取的化学物质，具有广泛的安全性历史。