与对香豆酸在 HCT-15 结肠癌细胞中的凋亡作用相关的事件。
摘要来源:World J Gastroenterol。 2013 年 11 月 21 日;19(43):7726-34。 PMID:24282361
摘要作者:Saravana Kumar Jaganathan、Eko Supriyanto、Mahitosh Mandal
文章隶属关系:Saravana Kumar Jaganathan
摘要:目的:研究蜂蜜中的酚类成分之一对香豆酸对人结直肠癌(HCT-15)细胞的凋亡作用相关事件。
方法:3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基-四唑溴化物测定法测定抗增殖剂对香豆酸对结肠癌细胞的作用。进行集落形成测定以量化对香豆酸处理后 HCT 15 和 HT 29 结肠癌细胞中的集落抑制。使用流式细胞术对 HCT 15 细胞进行碘化丙啶染色,以研究处理细胞的细胞周期的变化。使用扫描电子显微镜和显微照片评估暴露于对香豆酸后的 HCT 15 细胞进行细胞凋亡鉴定。使用 2, 7-二氯荧光素二乙酸酯评估暴露于对香豆酸的 HCT 15 细胞的活性氧 (ROS) 水平。在流式细胞术的帮助下,使用罗丹明-123 评估 HCT-15 的线粒体膜电位。使用染料部花青 540 对与对香豆酸处理相关的脂质层破裂进行定量。用 YO-PRO-1 染色后,对经过对香豆酸处理的 HCT 15 细胞进行流式细胞术分析,以确认和定量细胞凋亡。
结果:抗增殖试验显示对香豆酸对 HCT 15 和 HT 29 细胞有抑制作用,IC₅₀(浓度为50%抑制)值分别为1400和1600 μmol/L。集落形成测定揭示了对香豆酸处理后的 HCT 15 和 HT 29 细胞的时间依赖性抑制。经处理的 HCT 15 细胞的碘化丙啶染色显示,对香豆酸处理后,细胞周期的亚 G1 期凋亡细胞的积累不断增加(37.45 ± 1.98 vs 1.07 ± 1.01)。显微照片和扫描电镜观察,对香豆酸暴露后,HCT-15细胞出现起泡、皱缩等凋亡迹象。脂质层的评估表明,脂质层破裂的增加与对香豆酸的生长抑制有关。在对香豆酸处理的细胞中观察到线粒体膜电位下降和 ROS 生成增加。福通过 YO-PRO-1 染色评估的其他细胞凋亡也显示治疗后凋亡细胞呈时间依赖性增加。
结论:这些结果表明对香豆酸通过ROS-线粒体途径诱导细胞凋亡来抑制结肠癌细胞的生长。