牛蒡子苷元通过调节 miRNA-16 和 miRNA-199a 表达减轻炎症，为人神经母细胞瘤 SH-SY5Y 细胞提供针对机械创伤损伤的神经保护作用。
摘要来源：J Mol Neurosci 。 2016 年 9 月；60(1):115-29。 Epub 2016 年 7 月 7 日。PMID：27389368
摘要作者：宋杰、李娜、夏阳、高忠、邹萨峰、严玉辉、李少恒、王悦、孟亚坤、Jing-杨贤，康廷国
文章来源：宋杰
摘要：机械创伤是对神经细胞的严重损伤。随后的继发性损伤涉及炎症因子的释放，这些炎症因子对未受损的细胞产生严重后果，导致初次损伤后正常细胞死亡。本研究调查了牛蒡甙元 (ARC) 预防继发效应的能力，并评估了 microRNA (m使用 SH-SY5Y 细胞体外机械创伤损伤 (MTI) 模型中的 iRNA)-199a 和 miRNA-16。 SH-SY5Y 细胞通常应用于神经元功能和分化的体外模型。最近，miRNA 已被证明在 NF-κB 和胆碱能信号传导中发挥着至关重要的作用，可以调节炎症。该细胞模型是通过人SH-SY5Y细胞划痕诱导损伤建立的，模拟MTI的特征。使用细胞计数试剂盒-8 (CCK-8)、末端脱氧核苷酸转移酶 dUTP 缺口末端标记 (TUNEL) 和免疫细胞化学来测量细胞活力。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）评估炎症细胞因子和胆碱酯酶（CHE）含量。测量乳酸脱氢酶（LDH）含量以评估细胞损伤程度。通过RT-PCR测量mRNA水平来分析ARCs的作用机制。 miRNA抑制剂和模拟物用于抑制和增强miRNA的表达。蛋白质表达通过蛋白质印迹分析检测到。与对照组相比，ARC 治疗降低了 TNF-α 和 IL-6 水平以及划痕周围 TUNEL+ 凋亡 SH-SY5Y 细胞的数量，并增加了 IL-10 水平。 ARC减弱了划伤引起的细胞损伤程度和LDH含量的增加，表明细胞存活率增加。机制研究表明，ARC上调miRNA-16和miRNA-199a水平，从而减少上游蛋白（IKKα和IKKβ）表达并抑制NF-κB信号通路活性；此外，增加的 miRNA-199a 会抑制胆碱酯酶，从而增加胆碱能信号传导，导致促炎细胞因子的表达减少。 ARC 治疗通过正向调节 miRNA 表达来保护 SH-SY5Y 细胞，从而减少炎症反应。反过来，这些效应加速了划伤引起的损伤模型中的损伤修复。这些结果可能有助于了解其药理作用f ARC 在神经细胞抗炎和神经保护中的作用。